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植物样品直接pcr试剂盒
植物样品快速直接pcr试剂盒

产品名称:植物样品快速直接pcr试剂盒

产品简介:

植物样品快速免DNA提取直接PCR试剂盒(CATNO:0416-100AB

        
 只需要提供待处理的植物组织,引物就可以完成植物样品的直接PCR,可直接将PCR产物上样电泳检测。全过程15分钟完成。
组分      

溶液A 0.5 ml     溶液B 1 ml     缓冲液N 5 ml      2 × Direct PCR Mix 1 ml     ddH2O(PCR级) 10 ml


植物样品免DNA提取直接PCR试剂盒
产品特点:利用该试剂盒可以在15 分钟内开始从叶子(或其他植物组织)进行基因组DNA 的PCR 。该方法不需要用液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA 的沉淀。该试剂盒也可以对提取的基因组DNA 进行PCR 扩增。PCR试剂含有染料,可以直接在电泳胶上样。0.5 到17.5px 的植物叶片与提取液在95 度孵育10 分钟提取基因组DNA。加入同样体积的稀释液中和。然后可以取部分提取物进行PCR 扩增。产品储存:2 × DirectPCR Mix -20℃ 保存,避免反复冻融次数过多,3周内短时间使用可放4℃保存。其余常温或者4℃保存,有效期12个月。

制品说明:本制品采用独特的裂解缓冲液快速裂解植物组织,释放的DNA无需纯化便可以作为模板,用高度耐抑制物的2 × Direct PCR Mix扩增,扩增产物可直接上样电泳。

适用范围:简单非多糖、多酚植物等含有PCR干扰物质。
特点:简单,高通量筛选;一般扩增大小<2kb。
植物样品免DNA提取直接pcr试剂盒
操作步骤
1. 配制即用裂解液:按照5μl S溶液A+ 10μl 溶液B+ 85μl ddH2O = 100μl 比例配制成即用裂解液。每个样品需要50μl即用裂解液,具体量可以根据样品数量按照比例放大配制即可。
2. 取50μl裂解液于0.2 mL PCR薄壁管中(没有PCR仪器者也可以用0.5ml离心管)。然后置测试材料叶片(一般20mm2左右,可剪成3/4条放入)与裂解液中(也可以用吸头戳几下帮助裂解),吹打或者涡旋混匀,确保叶片碎块浸没在裂解液内。
3. 98℃裂解30min(建议PCR仪上操作),根据情况裂解时间可以在15分钟-1小时内调整。
4. 取出离心管迅速放冰上,加入50μl缓冲液 N,混匀,即可直接用做PCR模板或置于4℃或-20℃保存。
5. PCR扩增:
建议PCR条件(以20 μl反应体系为例)
Components Volume Final Concentration
裂解混合物模板 1 μl as required
2 × DirectAmp PCR Mix 10 μl 1 ×
Forward Primer (10 μM)  0.4 μl 0.2 μM each
Reverse Primer (10 μM)  0.4 μl 0.2 μM each
ddH2O to final volume  20 μl Not applicable
 PCR 循环
1 95℃      5-10 min
2 94℃      30 sec
3 54-60℃   30 sec      2-4  35-40 cycles
4 72℃      1 kb/min
5 72℃      5-10 min
植物样品免DNA提取直接pcr试剂盒
注意事项:
1.如果扩增条带较弱,可以适当增加减少模板加入量,裂解混合物模板一般可以在0.5μl-2μl内调节,但是注意一般不能超过4μl,加入太多,反而抑制PCR反应。
2. 如果样品多酚多糖较多,扩增效果不理想,可在20 μl PCR反应体系加入2μl 华越洋生产的多糖多酚清除剂改善效果。
3. 如果非特异扩增较多,可调整退火温度,或者适当增减模板用量。
4. 各溶液使用完毕后,应该立刻盖紧盖子,以免PH改变影响质量。

产品特点: 植物样品免DNA提取直接PCR试剂盒
产品应用: 0
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