产品名称： 全基因组扩增试剂盒

产品简介：

      全基因组扩增试剂盒

    全基因组扩增试剂盒产品特点：本品是用于基因组DNA扩增全基因组的试剂盒，可以方便、简单、快速、经济的得到稳定产量的基因组DNA扩增样品。本产品有如下优点： 

1. 基于phi29 DNA聚合酶的高保真性、高合成率和超强链取代能力。

2. 可以扩增基因组达上万倍，具有高产量和高保真性的特点。 

3. 可使用各种来源的样品，包括全血，干血，发根，口腔粘膜刮液培养细胞，真菌和病毒等。

4. 操作简便快捷，恒温（30℃）反应，无须PCR仪即可实现扩增。 

  产物可用于多种后续试验，包括多重PCR、长片断PCR、定量PCR、克隆、文库构建、单倍型分析、测序、基因芯片分析、各种遗传分析（片段差异，微卫星差异，SNP，STR）等。 

  全基因组扩增试剂盒产品组分：

低温运输、-20℃保存, 有效期一年。

    本全基因组扩增试剂盒适用于纯化好的基因组DNA。

  全基因组扩增试剂盒使用方法：

一、碱变性（碱变性法一般好于热变性法，推荐用户使用）

1. 在PCR塑料管中加入不超过2.5μL纯化好的基因组DNA，用量在100pg-100ng之间。如果体积不足2.5uL,则用超纯水补齐。最好同时做一个不加DNA模板的阴性对照。

2. 加入等体积（2.5 μL）变性液，轻柔吹打混匀。

3. 室温放置2分钟。

4. 加入5 μL WGA溶液A，轻柔吹打混匀后立即进入加WGA溶液B的步骤。此时样品总体积为10uL。注意：碱变性后的DNA样品不能久存，否则DNA会缓慢复性，所以必须马上进入下一步。

二、热变性法

1. 在PCR塑料管中加入1-5 μL纯化好的基因组DNA，用量在100pg-100ng之间。最好同时做一个不加DNA模板的阴性对照。

2. 加入5 μL WGA溶液A，轻柔吹打混匀。

3. 如果不足10 uL，补水到10 uL。

4. 在PCR仪器上 95℃加热变性3-5分钟，其间最好打开PCR仪的热盖。也可以使用95℃水浴加热3分钟。

5. 热变性结束后短暂离心（将蒸发到管壁的水甩下），然后将样品管在冰上放置至少5分钟，然后进入加WGA溶液B的步骤。注意：热变性的DNA样品不能久存，否则DNA会缓慢复性，所以必须马上进入下一步。

三、WGA反应

1. 在10 uL碱变性或热变性的DNA样品中（已经加入了5 uL WGA溶液A），加入等体积（10 μL）的 WGA溶液B，轻柔吹打混合均匀。

2. 加入1 uL Phi 29 DNA聚合酶（5U/uL），轻柔吹打混合均匀。

3. 30℃保温3-12小时。最好使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如果采用30℃水浴，最好在样品管中加入30-50uL石蜡油以防水分蒸发，因为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁，从而改变反应体系中各成分的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高，WGA三小时即可检测到DNA扩增。

4. 65℃保温10分钟使phi29 DNA聚合酶灭活。注：由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性，所以最好将其灭活以免干扰后续反应。

5. 立即取5-10 uL WGA反应液进行电泳检测扩增效果。

6. 扩增的DNA可以用于后续试验或当冰箱长期保存。